當(dāng)前位置： 首頁 - 新聞中心 - 專業(yè)知識(shí)
RPA（重組酶聚合酶擴(kuò)增）技術(shù)原理
英國TwistDx公司(前身為ASM科技有限公司)成立于1999年，基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術(shù)公司。該公司通過突破等溫DNA擴(kuò)增，開發(fā)的重組酶聚合酶擴(kuò)增專利技術(shù)(RPA),被譽(yù)為DNA診斷領(lǐng)域的革命性創(chuàng)新。(http://www.twistdx.co.uk)
What is RPA?
概念：重組酶聚合酶擴(kuò)增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)，被稱為是可以替代PCR的核酸檢測(cè)技術(shù)。RPA技術(shù)主要依賴于三種酶：能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，最佳反應(yīng)溫度在37°C左右。
RPA技術(shù)原理：
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成，對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中，由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過程進(jìn)行得非常快，一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。
Who uses RPA?
以此為基礎(chǔ)的TwistAmp? 核酸擴(kuò)增產(chǎn)品，能夠在15分鐘內(nèi)進(jìn)行常溫下的單分子核酸檢測(cè)該技術(shù)對(duì)硬件設(shè)備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物安全、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。
TwistAmp? Basic 試劑盒可實(shí)現(xiàn) DNA 擴(kuò)增。包含 DNA 擴(kuò)增所需的所有酶和試劑，用戶只需提供引物和模板。使用 TwistAmp? Basic 時(shí)，即使 PCR 引物也有效。TwistAmp? Basic 已被用于固相、加尾引物、配基、電化學(xué)和微陣列等應(yīng)用。
非常適用于：終點(diǎn)凝膠電泳 DNA 檢測(cè)、下游應(yīng)用（例如亞克?。?span>
TwistAmp? exo 試劑盒可實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)熒光 DNA 擴(kuò)增。若想要以均相形式將 TwistDx RPA 擴(kuò)增技術(shù)與 TwistDx 專利熒光 TwistAmp? exo 探針結(jié)合使用，則推薦使用本產(chǎn)品。用戶只需提供引物、探針和模板。更多信息請(qǐng)參閱手冊(cè)。
非常適用于：實(shí)時(shí)熒光 DNA 檢測(cè)
TwistAmp? nfo 試劑盒可實(shí)現(xiàn)橫向流動(dòng)檢測(cè)用 DNA 擴(kuò)增。若想要通過終點(diǎn)夾心法（例如橫向流動(dòng) [LF] 試紙條）檢測(cè)有效 DNA 擴(kuò)增反應(yīng)的產(chǎn)物，則適合使用本產(chǎn)品。用戶只需提供引物、探針和模板。
非常適用于：開發(fā)低成本的現(xiàn)場側(cè)向?qū)游鰴z測(cè)方法。
包含凍干試劑的 TwistAmp? 試劑盒具有以下優(yōu)勢(shì)：
RPA 擴(kuò)增溫度要求低，允許使用低成本、便于攜帶的檢驗(yàn)設(shè)備。
干 RPA 試劑足夠穩(wěn)定，可以在室溫下運(yùn)輸。
允許多種「適宜現(xiàn)場的」檢測(cè)輸出技術(shù)，例如側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)和熒光技術(shù)。
RPA 對(duì)一些復(fù)雜樣本類型表現(xiàn)出高度穩(wěn)健性（即樣本耐受性），更適合于許多不同的現(xiàn)場實(shí)地應(yīng)用。
除了在現(xiàn)場實(shí)地使用中的優(yōu)勢(shì)，通過 TwistAmp? 試劑盒還便于為許多應(yīng)用和用途開發(fā)出快速、特異且靈敏的 DNA 和 RNA 檢測(cè)方法。
TwistAmp? Liquid 是為了提供散裝液體形態(tài)的核心 RPA 組分，最終用戶能夠以不同的比例混合這些組分，以便用戶為各自的應(yīng)用配制預(yù)混液*。
TwistAmp? Liquid 具有以下優(yōu)勢(shì)：
最終用戶可自由調(diào)整預(yù)混液制備量，而不再被局限于凍干試劑的固定體積
最終用戶可自由調(diào)整反應(yīng)體系中的組分比例，這使 RPA 試驗(yàn)開發(fā)工作具有更大的靈活性
TwistAmp? Liquid Basic 是一款最適合用于凝膠分析或者作固相、加尾引物、適配體、電化學(xué)和微陣列應(yīng)用的 DNA 擴(kuò)增試劑盒。TwistAmp? Liquid exo 是一款用于以實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)擴(kuò)增反應(yīng)的 DNA 擴(kuò)增試劑盒。
相關(guān)鏈接：http://www.www.ladymagic.cn/goods/149/2.html
|
貨號(hào) |
產(chǎn)品 |
規(guī)格 |
|
JY0209 |
50T |
|
|
JY0307 |
50T |
|
|
JY0301 |
50T |
|
|
JY0308 |
50T |
|
|
WLB8201KIT |
48T |
|
|
WLE8202KIT |
48T |
|
|
WLN8203KIT |
48T |
|
|
WLRB8204KIT |
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（基礎(chǔ)型） |
48T |
|
WLRE8205KIT |
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（熒光型） |
48T |
|
WLRN8206KIT |
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（膠體金試紙條型） |
48T |
|
WLB5001 |
DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體基礎(chǔ)型） |
100T |
|
WLN5002 |
DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體膠體金型） |
100T |
|
WLR5003 |
DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體熒光型） |
100T |
|
WLRB5001 |
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體基礎(chǔ)型） |
100T |
|
WLRN5002 |
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體膠體金型） |
100T |
|
WLRE5003 |
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體熒光型） |
100T |